Mẫu Nghi Thiên Hạ xoay quanh cuộc đời của Vương Chính Quân, một người phụ nữ bình thường nhưng nhờ sự thông minh, bản lĩnh và đức hạnh của mình đã leo lên ngôi vị cao nhất. Bà trở thành Hoàng hậu nhà Hán và tiếp tục giữ ngôi vị Thái hậu trong nhiều triều đại.
Hành trình của Vương Chính Quân không hề dễ dàng. Trong chốn hậu cung hiểm ác, bà phải đối mặt với những âm mưu tranh quyền đoạt vị, tình thân và tình yêu. Mỗi bước đi của bà đều được tính toán kỹ lưỡng, vừa phải giữ được vị trí của mình, vừa phải bảo vệ gia đình và bản thân.
Bộ phim không chỉ mang màu sắc lịch sử mà còn ca ngợi phẩm hạnh, sự kiên cường và tầm ảnh hưởng của một trong những nữ nhân quyền lực bậc nhất Trung Hoa. Câu chuyện về Vương Chính Quân là một minh chứng cho thấy trí tuệ và lòng nhân đức có thể giúp một người phụ nữ đạt được những điều không thể.